項(xiàng)目名稱(chēng)：    哺乳動(dòng)物排卵和黃體萎縮機(jī)理的研究

推薦單位：    中國(guó)科學(xué)院

項(xiàng)目簡(jiǎn)介：    1、本項(xiàng)目屬于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，歷時(shí)20多年研究,系統(tǒng)揭示了由PA和其抑制因子PAI-1在排卵和黃體萎縮中的功能，作出了自主性，原創(chuàng)性和系統(tǒng)性貢獻(xiàn)。

2、主要研究?jī)?nèi)容及科學(xué)價(jià)值:

（1）發(fā)現(xiàn)卵細(xì)胞和顆粒細(xì)胞表達(dá)tPA,膜細(xì)胞表達(dá)PAI-1，兩者的協(xié)同表達(dá)導(dǎo)致局部定向蛋白水解產(chǎn)生誘發(fā)排卵；系統(tǒng)研究發(fā)現(xiàn)：1) 除已知排卵激素LH/hCG外，GnRH, FSH和VIP 也能通過(guò)誘導(dǎo)卵子和GC tPA表達(dá)和引起排卵; 2)抑制GC tPA表達(dá)的消炎痛能抑制排卵；3)刺激TC PAI－1表達(dá)的促乳素能抑制排卵；4)靈長(zhǎng)類(lèi)排卵同樣是由 tPA和PAI－1協(xié)同調(diào)控的。在此基礎(chǔ)上，提出了排卵機(jī)制的新學(xué)說(shuō)。

（2）排卵后GC和TC轉(zhuǎn)化為黃體,黃體分泌孕酮維持妊娠。發(fā)現(xiàn)黃體繼續(xù)表達(dá)tPA和PAI－1，兩者的協(xié)同表達(dá)可誘發(fā)黃體萎縮，提出了黃體萎縮的新觀點(diǎn)，開(kāi)拓了新研究領(lǐng)域。

（3）對(duì)tPA和PAI-1在卵巢不同細(xì)胞中的協(xié)同表達(dá)和相互作用的發(fā)現(xiàn),為蛋白質(zhì)組學(xué)在生理水平上研究分子間的“激活"與"抑制"機(jī)制提供了一個(gè)典型例證。本研究對(duì)探索經(jīng)濟(jì)動(dòng)物多排卵調(diào)控方法和發(fā)展女性避孕新途徑提供了新的研究思路和理論基礎(chǔ)。

3、同行引用及評(píng)價(jià)情況

本項(xiàng)目發(fā)表論文77篇，其中SCI收錄論文51篇，他人引用639次，其中單篇引用申請(qǐng)者三篇以上的引文（他引）29篇。前十篇代表性論文被包括Physiol Review (IP:33.918)、 AnnualReview Physiol (IP:16.672)、 J.Clin.Invest. (IF:14.204) 等高影響因子在內(nèi)的SCI刊物引用50次。

主要發(fā)現(xiàn)點(diǎn)：  1)大鼠和恒河猴卵細(xì)胞和顆粒細(xì)胞（GC）表達(dá)tPA,其GC也產(chǎn)生尿激酶(uPA)，但只有tPA受激素調(diào)節(jié)并在排卵中起重要作用;uPA不受激素調(diào)節(jié), 并排除了過(guò)去由著名美國(guó)科學(xué)家Stricland (Canipari R & Stricland S: JBC 1985, 260: 121-5125)首先提出,并得到許多科學(xué)家支持的,認(rèn)為uPA在排中起主要作用的結(jié)論(代表性論文第1,10,其他論文11- 15)(學(xué)科分類(lèi):生殖生理學(xué)3102141)。

2)卵泡壁細(xì)胞(TC)表達(dá)tPA抑制因子PAI－1，在激素作用下tPA和PAI－1在卵巢中的協(xié)同表達(dá)是誘發(fā)卵泡破裂的原因(代表性論文第1,其他論文17,11,23)(學(xué)科分類(lèi):動(dòng)物生殖生物學(xué)1805745)。

3)系統(tǒng)研究證明，除所謂排卵激素LH/hCG能誘發(fā)GC tPA增加而引起排卵外，其他激素,如GnRH,VIP等也能促 進(jìn)GC tPA表達(dá),并證實(shí)這些激素也能誘發(fā)排卵;同時(shí)研究了相關(guān)的分子機(jī)制和信號(hào)通路(代表性論文第4,5,7其他論文14，21，17，35，36)(學(xué)科分類(lèi):生殖生理學(xué)3102141)。

4)系統(tǒng)研究證明,能抑制GC tPA表達(dá)的分子(如消炎痛),能抑制排卵;能刺激卵泡PAI－1表達(dá)的物質(zhì),如促乳素,能 抑制排卵 (代表性論文第4,5,其他論文17,24)(學(xué)科分類(lèi):生殖生理學(xué)3102141)。

5)對(duì)不同動(dòng)物卵巢中PA比較研究證實(shí)，除大鼠,靈長(zhǎng)類(lèi)外，在文昌魚(yú)、小鼠、貓、地鼠、人、大熊貓卵巢中都鑒定出不同分子量的tPA，但有些動(dòng)物卵巢中未發(fā)現(xiàn)uPA(代表性論文第10,其他論文17)(學(xué)科分類(lèi):生殖生理學(xué)3102141）。

6)在大鼠,小鼠和恒河猴黃體中首先鑒定出tPA、uPA和PAI－1；當(dāng)黃體開(kāi)始萎縮,孕酮分泌和StAR表達(dá)突然下降時(shí)，總伴隨其tPA和PAI－1協(xié)同表達(dá)的突然增加。發(fā)現(xiàn)uPA與黃體早期發(fā)生和孕酮分泌相關(guān)(代表性論文第2,3,8)(學(xué)科分類(lèi):生殖生理學(xué)3102141）。

7)離體實(shí)驗(yàn)証實(shí),加tPA抗原可抑制大鼠和恒河猴黃體細(xì)胞孕酮分泌；而加tPA抗體可使孕酮分泌能力增加;LH和PRL協(xié)同維持黃體功能，刺激黃體細(xì)胞孕酮分泌,StAR和uPA產(chǎn)生，而同時(shí)卻抑制tPA分泌。細(xì)胞因子IFN-α能抑制黃體孕酮分泌，增加黃體tPA活性,有促黃體萎縮的作用(代表性論文第3,4,9)(學(xué)科分類(lèi):生殖生理學(xué)3102141）。

主要完成人：  1.   劉以訓(xùn)

本人是項(xiàng)目的主持者，組織者，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)者以及主要工作的完成者；發(fā)表本項(xiàng)目有關(guān)論文70余篇。在所提出的所有創(chuàng)新點(diǎn)中，都是主要工作完成者提出了在激素作用下，卵泡顆粒細(xì)胞表達(dá)的tPA和膜細(xì)胞表達(dá)的抑制因子PAI-1在時(shí)間和空間上的協(xié)同表達(dá)是誘發(fā)泡破裂,引起排卵的原因和tPA/PAI-1 在黃體萎縮中的作用。本人在主要發(fā)現(xiàn)點(diǎn)中的1-7點(diǎn)都作出了主要貢獻(xiàn)，本人在該項(xiàng)目研究中的工作量占本人工作量的70% 。支持材料:論文1-10.

2.   劉奎

本人是本研究項(xiàng)目部分工作的主持者和研究方案設(shè)計(jì)者，本項(xiàng)研究的主要具體參加者和完成者之一。主要貢獻(xiàn)：用假孕恒河猴和大鼠為模型,鑒定出黃體tPA, uPA和PAI－1,當(dāng)黃體后期開(kāi)始萎縮時(shí)(孕酮分泌突然下降)，tPA和PAI-1表達(dá)上升,與黃體萎縮相關(guān)。在主要發(fā)現(xiàn)點(diǎn)中的第6和7中作出了主要貢獻(xiàn)。本人在該項(xiàng)研究期間工作量占本人當(dāng)時(shí)工作量的60% 。支持材料:論文1,2,4,6,9.

3.   彭曉蓉

本人是本項(xiàng)研究部分工作的主持者和研究方案的設(shè)計(jì)者，是具體參加者和完成者之一。主要貢獻(xiàn)：用原位雜交方法測(cè)定tPA和PAI-1在大鼠卵巢細(xì)胞中的表達(dá),用Nothern Blot方法定量測(cè)定。在主要發(fā)現(xiàn)點(diǎn)中的第1和第2中作出了主要貢獻(xiàn)。本人在該項(xiàng)研究中的工作量占本人工作量的60% 。支持材料:論文4.

4.   馮強(qiáng)

本人是本該研究項(xiàng)目的主要完成者之一。在黃體萎縮和排卵研究中首先發(fā)現(xiàn)了小鼠卵巢除主要表達(dá)uPA外，還表達(dá)tPA，并且在激素誘導(dǎo)下，在排卵前也達(dá)到高峰，證實(shí)小鼠卵巢tPA在排卵過(guò)程中也起重要作用。本人在主要發(fā)現(xiàn)點(diǎn)中的第1，5，6中作出了貢獻(xiàn)。本人在該項(xiàng)研究中的工作量占本人工作量的50% 。支持材料:論文1,2,3,8,9.

5.   胡召元

本人是該項(xiàng)目研究的主要完成者之一。在各項(xiàng)研究中作了大量具體實(shí)驗(yàn)工作。主要貢獻(xiàn)：以小鼠為動(dòng)物模型，研究了促乳素(PRL)對(duì)其顆粒細(xì)胞甾體激素分泌和PA系統(tǒng)表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)PRL在離體下抑制顆粒細(xì)胞芳香化酶的活性；在主要發(fā)現(xiàn)點(diǎn)中的第1，5，6，7作出了貢獻(xiàn)。本人在該項(xiàng)目研究中的工作量占本人工作量的 70% 。支持材料:論文1,2,5,7.

10篇代表性論文：  1.   Tissue-type Plasminogen Activator and Its Inhibitor Plasminogen Activator Inhibitor Type 1 Are Coordinately Expressed during Ovulation in the Rhesus Monkey. / Endocrinology

2.   Expression and Regulation of Plasminogen Activators, Plasminogen Activator Inhibitor type-1 and steroidogenic acute regulatory protein in the Rhesus Monkey Corpus Luteum./ Endocrinology

3.   Expression of the Steroidogenic Acute Regulatory Protein and Luteinizing Hormone Receptor and Their Regulation by Tumor Necrosis Factor α in Rat Corpora Lutea./Biol Reprod.

4.   Prolactin Regulation of Tissue Type Plasminogen Activator and Plasminogen Activator Inhibitor Type-1 Gene Expression in eCG-Primed Rat Granulosa cells in culture/ Biol Reprod

5.   Prolactin delays gonadotropin-induced ovulation and down-regulates expression of the plasminogen activator system in the ovary./ Human Reproduction

6.   Temporal expression of urokinase type plasminogen activator,tissue plasminogen activator,plasminogen activator inhibitor type-1 in rhesus monkey corpus luteum during the luteal maintaince and regressi

7.   Activation of the p38 MAPK pathway by follicle-stimulating hormone regulates steroidogenesis in granulosa cells differentially. Journal of Endocrinology

8.   Studies on the Role of Plasminogen Activators and Plasminogen Activator Inhibitor Type-1 in Rat Corpus Luteum of Pregnancy./ Biol. Reprod.

9.   The possible involvement of tissue type plasminogen activator in luteolysis of rhesus monkey/Human Reproduction

10.  Regulation of plasminogen activator system in the ovary /Biological Signals and Receptors